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          電子顯微鏡的成像原理

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          電子顯微鏡的成像原理

          發布日期:2017-11-03 作者: 點擊:

          日立電子顯微鏡成像原理/電子顯微鏡 

          1.透射電鏡技術

          透射電鏡是以電子束透過樣品經過聚焦與放大后所產生的物像,投射到熒光屏上或照相底片上進行觀察。透射電鏡是以電子束透過樣品經過聚焦與放大后所產生的物像,投射到熒光屏上或照相底片上進行觀察。透射電鏡的分辨率為0.1~0.2nm,放大倍數為幾萬~幾十萬倍。透射電鏡的分辨率為0.1~0.2nm,放大倍數為幾萬~幾十萬倍。由於電子易散射或被物體吸收,故穿透力低,必須制備更薄的超薄切片(通常為50~100nm)。由于電子易散射或被物體吸收,故穿透力低,必須制備更薄的超薄切片(通常為50~100nm)。其制備過程與石蠟切片相似,但要求極嚴格。其制備過程與石蠟切片相似,但要求極嚴格。要在機體死亡后的數分鐘釣取材,組織塊要小(1立方毫米以內),常用戊二醛和餓酸進行雙重固定樹脂包埋,用特制的超薄切片機(ultramicrotome)切成超薄切片,再經醋酸鈾和檸檬酸鉛等進行電子染色。要在機體死亡后的數分鐘釣取材,組織塊要小(1立方毫米以內),常用戊二醛和餓酸進行雙重固定樹脂包埋,用特制的超薄切片機(ultramicrotome)切成超薄切片,再經醋酸鈾和檸檬酸鉛等進行電子染色。電子束投射到樣品時,可隨組織構成成分的密度不同而發生相應的電子發射,如電子束投射到質量大的結構時,電子被散射的多,因此投射到熒光屏上的電子少而呈暗像,電子照片上則呈黑色。電子束投射到樣品時,可隨組織構成成分的密度不同而發生相應的電子發射,如電子束投射到質量大的結構時,電子被散射的多,因此投射到熒光屏上的電子少而呈暗像,電子照片上則呈黑色。稱電子密度高(electrondense)。稱電子密度高(electrondense)。反之,則稱為電子密度低(electronlucent)。反之,則稱為電子密度低(electronlucent)。

          2。掃描電鏡術

          掃描電鏡是用極細的電子束在樣品表面掃描,將產生的二次電子用特制的探測器收集,形成電信號運送到顯像管,在熒光屏上顯示物體。掃描電鏡是用極細的電子束在樣品表面掃描,將產生的二次電子用特制的探測器收集,形成電信號運送到顯像管,在熒光屏上顯示物體。(細胞、組織)表面的立體構像,可攝制成照片。(細胞、組織)表面的立體構像,可攝制成照片。


          掃描電鏡樣品用戊二醛和餓酸等固定,經脫水和臨界點干燥后,再於樣品表面噴鍍薄層金膜,以增加二波電子數。掃描電鏡樣品用戊二醛和餓酸等固定,經脫水和臨界點干燥后,再于樣品表面噴鍍薄層金膜,以增加二波電子數。掃描電鏡能觀察較大的組織表面結構,由於它的景深長,1mm左右的凹凸不平面能清所成像,故放樣品圖像富有立體感。掃描電鏡能觀察較大的組織表面結構,由于它的景深長,1mm左右的凹凸不平面能清所成像,故放樣品圖像富有立體感。FIB聚焦離子束

          日立電子顯微鏡


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